Kā cryopreservation palielina mēslošanas iespējas?
Ar dabisko apaugļošanu vīriešu dzimuma dziedzeru noslēpums tiek daļēji sajaukts ar epidermas šūnām, kā rezultātā rodas zināmas izmaiņas barības pH vidē, kas izraisa spermatozoīdu lipoproteīna pārklājuma iznīcināšanu, t.i. to aktivizēšanai. Atrodoties šajā stāvoklī, reproduktīvo šūnu mūžs ir stipri ierobežots, un tas izslēdz to turpmāku izmantošanu IVF. Tieši tādēļ tiek izmantota kriofonēšanas metode .
Šis paņēmiens ievērojami palielina spermas glabāšanas laiku un ļauj:
- samazināt spermatozoīdu kustīgo aktivitāti;
- nodrošina viņiem papildu enerģijas avotu;
- aizsargā cilmes šūnu membrānas no iznīcināšanas;
- novērš toksisku vielmaiņas produktu uzkrāšanos;
- bloķē mikroorganismu reprodukciju ejakulācijā.
Kādus medijus izmanto, lai uzglabātu spermu?
Lai atvieglotu spermas iepriekšēju atšķaidīšanu, tā saucamais ejakulācijas saspiešanas process, kas vajadzīgs cilmes šūnu izdalīšanai, ir nepieciešams. Izmanto īpašus reaģentus.
Līdz šim ir ierasts izmantot sintētisko mediju spermas uzglabāšanai, no kuriem katram nepieciešams īpašs nosacījums. Raksturīgi, ka šāda veida vide sastāv no vairākām sastāvdaļām, parasti vismaz trīs. Tātad, to struktūrā ir iespējams piešķirt cukuru, visbiežāk un tiek izmantota glikoze un laktoze, nātrija citrāts.
Ja mēs runājam par specifiskiem ķīmiskiem savienojumiem, kurus var izmantot kā līdzekli spermas uzglabāšanai, tad starp tiem var saukt Tris-buferšķīdumu, Trilon B, EDTA, Spermosan PPK.
Kādos apstākļos tiek uzglabāts ejakulāts?
Spermas sasaldēšanas un uzglabāšanas tehnoloģijai ir jāievēro īpašs dzesēšanas režīms, kā arī īpašu ierīču izmantošana. Šādā gadījumā pašai laboratorijas telpai obligāti jābūt aprīkotām ar ierīcēm, kas sterilizē gaisu.
Pirms ejakulācijas savākšanas visas nepieciešamās ierīces krioizturīgai uzglabāšanai, jo īpaši visu veidu kolbas, graduētus cilindrus, pipetes, papīra filtrus sterilizē īpašā skapī 130-150 grādu temperatūrā. Pirms tiešās paraugu ņemšanas procedūras tās ievieto īpašā termostatā, kas uztur nemainīgu 37 grādu temperatūru.
Kad vīriešu spermas paraugs tiek noņemts, to ievieto sterilā kolbā. Spermas uzglabāšanas temperatūrai jābūt nemainīgai. Dzesēšanas process tiek veikts divos posmos.
Lai izmantotu agresīvu ejakulātu, kas agrāk bija pasargāts no kriogēniem, kuģis kopā ar to ievieto siltā ūdenī, kur notiek lēns atlaidums. Pēc tam, lietotie krioprotektori tiek noņemti, atkārtojot spermas atkārtotu nokrišņu veidošanos uz centrifūgas. Pēc tam sēklu šķidrums tiek aizstāts ar uzturvielu, kurā vēlāk ievieto spermatozoīdus.